Rh血型抗体的检测及结果分析（,-,）

Rh血型抗体的检测及结果分析（,-,）

Rh血型抗体的检测及结果分析[标签:来源]作者：**军,【摘要】目的:调查Rh血型抗体的检出率及其特异性分布特点,分析Rh血型抗体的临床意义及产生规律。方法:采用微柱凝胶抗球蛋白技术筛查和鉴定红细胞血型不规则抗体,对鉴定为Rh血型抗体者rh血型抗原性最强的是,鉴定红细胞Rh血型抗原,以确认抗体的准确性;检测抗体的效价、Ig类型及37反应性,以明确其临床意义;询问孕产史、输血史,如果为新生儿检测其母亲血浆中是否有相同特异性的抗体,以分析抗体产生的原因。结果:就诊者54000例,共检出Rh血型抗体47例,检出率为0.087%,其中有妊娠史者27抗体来自母体的新生儿6抗体的特异性为:E29例(61.70%)、D8例(17.02%)、cE5(10.64%)、c4例(8.51%)、C1例(2.13%);47例Rh血型抗体均为IgG或IgG+IgM37均可与具有相应抗原的红细胞反应,抗体效价介于1～4096。结论:被检就诊者Rh血型抗体的检出率低于白种人;在检出的Rh血型抗体中,出率呈逐步减少的趋势;妊娠和输血引起的同种免疫是Rh血型抗体产生的原因,新生儿自母体被动获得的Rh血型抗体是最主要的致病抗体。

【关键词】Rh血型不规则抗体免疫溶血性输血反应新生儿溶血病微柱凝胶抗球蛋白试[]AIM:.:’stest.,(.,.,.,s.:(0.087%)dies.,,:29(17.02%),(10.64%),(2.13%)..:tion.,.ction..[];;;born;´血型抗体是除ABO血型系统以外最具临床意义的红细胞血型抗体,常引起免疫溶血性输血反应（HTR）及新生儿溶血病（HDN）,调查Rh血型抗体的检出率及特异性分布情况Rh血型抗体的检测及结果分析（,-,）,解Rh血型抗体产生的规律,对预防HTR及HDN具有重要的临床意义。

我们采用微柱凝胶抗球蛋白技术,检测了54000例就诊者的红细胞血型不规则抗体,共检出Rh血型抗体47材料和方法1.1材料研究对象:2004-05/2007-05,在我院就诊的手术患者、需要或预备输血的非手术患者、孕妇、部分新生儿及健康体检者共54000年龄1d～99岁。仪器试剂:微柱凝胶抗球蛋白卡及专用孵育器、离心机为长春博迅生物技术有限责任公司生产;筛检红细胞、谱红细胞为上海市血液生物医药有限公司生产;0.2mol/L2Me（2为美国DBL公司生产。1.2方法1.2.1红细胞血型不规则抗体的筛查被检者抗凝血标本3mL,3000r/min离心5min采用微柱凝胶抗球蛋白技术,使被检者血浆与筛检红细胞（3胞）反应,筛查红细胞血型不规则抗体。被检者血浆与3人份筛检红细胞中任何1、人份筛检红细胞均无凝集者为阴性。1.2.2红细胞血型不规则抗体的特异性鉴定将红细胞血型不规则抗体筛查结果为阳性研究对象的血浆,采用微柱凝胶抗球蛋白技术分别与由10人份O型红细胞组成的谱红细胞及自身红细胞（均为1%）反应。与谱红细胞中1至数人份凝集,与自身红细胞不凝集者为特异性抗体,并根据与谱红细胞的反应格局判定抗体的特异性;对鉴定为Rh血型抗体者,试剂检测Rh血型以确认所检抗体的准并询问孕产史、输血史,如果为新生儿检测其母亲血浆中是否有相同特异性的抗体,以分析抗体产生的原因。

1.2.3Rh血型抗体免疫球蛋白类型的鉴定取检出Rh血型抗体者的血浆0.2mL加入等量0.2mol/L2Me后密封,37孵育30min后用生理盐水倍比稀释,采用微柱凝胶抗球蛋白技术与具有相应Rh血型抗原的红细胞反应,Me处理前无变化者为IgGMe处理前有所降低、但仍有反应者为IgG+IgM抗体,Me处理后与具有相应血型抗原的红细胞无反应者为IgM类抗体。1.2.4Rh血型抗体37反应性的鉴定采用盐水法、试管间接抗球蛋白试验2种方法分别使被检者血浆与具有相应Rh血型抗原的红细胞反应,只要其中任何一种方法在37有凝集即可判断为37有反应的抗体,具有临床意义。1.2.5Rh血型抗体效价测定取检出Rh血型抗体者的血浆用生理盐水倍比稀释后,用微柱凝胶抗球蛋白试验,与具有抗体对应的Rh血型抗原的红细胞反应以检测其效价。1.2.6检出Rh血型抗体的新生儿血型血清学试验 对检出Rh血型抗体的新生儿,鉴定 Rh 血型、 做红细胞直接抗球蛋白试验（DAT）及红细胞放散试验rh血型抗原性最强的是, 并鉴定放散液中的抗体及 其特异性。 结果2.1 Rh 血型抗体的检出率及在不同就诊人群中的分布 就诊者54000 检出Rh血型 抗体47 例（检出率为0.087%）, 其中男13 例（占被检男性0.052%）, 女34 性的0.117%）。

检出的47例Rh 血型抗体阳性者中41 例为成人（占87.234%）, 的新生儿(占12.766%)。41例Rh 血型抗体阳性成人中, 有妊娠史者27 例（占57.447%）, 中孕妇12例(占25.532%）; 有输血史者13 例（占27.660%）; 既有妊娠史又有输血史者1 例（占2.128%）。6 例新生儿的抗体均来自母体, 其母亲均为以上检出Rh 血型抗体的12 新生儿抗体特异性与其母亲抗体特异性完全一致,新生儿红细胞直接抗球蛋白 试验（DAT）及红细胞放散试验均为阳性, 符合Non ABO HDN 诊断, 占同时期检出的11 例Non ABO HDN 患儿的54.545%。12 例Rh 血型抗体阳性的孕妇中除6 例所产新生儿被诊 断为Non ABO HDN 另有2例发生了宫内死胎, 其余4 例孕妇Rh 血型抗体效价均4, 所产新生儿血浆中均未检出 Rh 血型抗体。除新生儿外, 既无妊娠史又无输血史者均未检出 Rh 血型抗体。 2.2 Rh 血型抗体的特异性分布 检出47 例Rh 血型抗体的特异性分布为: E29 (61.702%)、D8 例(17.021%)、 cE5 例(10.638%)、 c4 例(8.511%)、 C1 例（2.128%）。

2.3 Rh血型抗体的效价、 Ig类型及37反应性 检出的47例Rh血型抗体效价介于1～ 4096, 其中效价为4096 cE),效价为64 效价介于1～16者33 C1例)。47 例Rh 血型抗体均为IgG IgG+IgM,在37均可与具有相应抗原的红细胞反应。 讨论Rh 血型系统是已发现的29 个人类红细胞血型系统中最具遗传多态性的红细胞血型系统, 所表达的血型抗原多达55 其中Rh(D)抗原性最强,其次为Rh(E)、 Rh(C)、 Rh(c)、 Rh(e)等, 因输血或妊娠等同种免疫易产生相应同种抗体, 再次Rh 血型不相容输血或妊娠可 引起严重的HTR 及HDN[2]。在临床输血中Rh 血型相容性的意义仅次于ABO 血型, 而由于Rh 血型抗原表位是多肽, 在胎儿出生时已发育成熟, 与相应的 IgG 抗体亲和力较强, 严重的 HDN 病例多由Rh 血型抗体引起, 在HDN 的发病方面, Rh 血型抗体较ABO血型抗体更为重要[3]。 因此, 调查Rh 血型抗体的检出率及特异性分布情况, 了解Rh 血型抗体产生的规律, 对预防 HTR 及HDN 具有重要的临床意义。由于不同种族人群红细胞Rh 血型遗传多态性决定了其抗原 表型存在差异, 接受 Rh 血型抗原免疫的机率不同, Rh 血型抗体的检出频率及抗体特异性分 布也存在人群及地区差异[4]。

白种人Rh(D)阴性频率较高, Rh 血型抗体是最常见的红细胞血 型不规则抗体, 检出频率高达0.98%[5], 而汉族人Rh(D)阴性频率仅为0.3%～0.6%, Rh 血型 Lea[6]。本研究中54000例就诊者Rh 血型抗体的检出率仅为 0.087%,远低于白种人。在Rh 血型抗体中各特异性抗体所占比率rh血型抗原性最强的是, 白种人中不同的调查结果 差异较大, 都是最多见的Rh血型抗体[5, 而本研究中Rh血型抗体中 各特异性抗体所占比率依次为: E(61.70%)、 D(17.02%)、 cE (10.64%)、 c(8.51%)、C(2.13%）, 与白种人比较, 的比率较低, 这可能是因为我国人群Rh(E)阴性频率远高于Rh(D)阴性频率,受Rh(E)同种免疫机率 较高而又没有采取有针对性的预防措施[8]。 输血和妊娠同种免疫是红细胞血型抗体产生的重要原因风水研究, 但ABO 血型系统的抗体及MNSs、 Lewis、 血型系统中的部分抗体可在无明显同种异体抗原免疫的情况下产生[6]。本研究中检出的47 例Rh 血型抗体中, 例新生儿抗体来自母体外,41 例成人均有妊娠史或输血史, 抗体来自母体的6 例Rh HDN 患儿占同期检出Non ABO HDN 患儿的54.55%, 而其他所 有无妊娠史及输血史的被检者中均未检出 Rh 血型抗体, 表明妊娠和输血引起的同种免疫是 Rh 血型抗体产生的原因, 新生儿自母体被动获得的Rh 血型抗体是Non ABO HDN 最主要 的致病抗体。

红细胞血型抗体的主要临床意义在于是否可引起HTR 及HDN, 只要37可与相应抗原反 应的血型抗体(IgM 类或IgG 类)都可引起HTR, 而只有37可与相应抗原反应的IgG 类抗体 才可引起HDN。本研究中采用微柱凝胶抗球蛋白技术检出的47 例Rh 血型抗体均为IgG IgG类+IgM 并且在37都可与相应抗原发生凝集反应,表明所检出的Rh 血型抗体均 具有临床意义。除血型抗体的 Ig 类型及 37反应性外, 红细胞血型抗体的效价与临床意义 也密切相关, 抗体效价越高致敏红细胞的能力越强, 其导致HTR 及HDN 的程度也越严重, 研究中检出12例孕妇血浆中有Rh 血型抗体, 其中2 例发生了宫内死胎, 分娩的新生儿有6 例被证实其红细胞被来自母体的Rh血型抗体致敏, 其余4例红细胞未被抗体致敏的新生儿母 亲血浆Rh 血型抗体效价均4。近年来的研究表明, 孕妇血浆中Rh 血型抗体的IgG 亚类与其 导致的HDN的严重程度密切相关, 由IgG1、 IgG3致敏红细胞后所致HDN的严重程度较IgG2、 IgG4 致敏红细胞后严重[9]。因此对检出Rh 血型抗体的孕妇, 进一步检测IgG 抗体的效价及 IgG 可为评估胎儿发生HDN的严重程度、 制定合理的干预措施提供参考。

国内 1981～2000 年报道的 HTR HDN 引起的病例高达48.38%(224/463)[10], 只占检出Rh血型抗体的17.02%, 这是因为近年来我 国实行了Rh(D)相容性输血, 绝大多数Rh(D)阴性受血者都能接受Rh(D)阴性血的输注, 越来越少;另一方面, 我国实行计划生育政策, 育龄妇女的平均妊 娠次数减少也可能是Rh 血型抗体检出率较低的原因之一。但值得重视的是, 检出率的逐渐减少, 已成为最多见的Rh血型抗体, 致HTR及HDN 的报道较多, 一样采用Rh(E)相容输血有待研究。【参考文献】 , JP, etal. : [J]. Vox Sang, 2003, 84(3): 244-247. Rh(D)抗原及Rh血型免疫性抗体检测的分析[J]. 细胞与 分子免疫学杂志, 2004, 20(2): , . [J]. Semin , 2000, 37(2): 197-203. Assoc, 1997, 96(12): 933-942. , LD, et al. RBC , [J]. , 2001, 41(11): 1413-1420. 汉族患者(30800例)及孕妇(4200 例)红细胞血型不 规则抗体分布的调查[J]. 第四军医大学学报, 2007, 28(10): 922-925. etal. cell [J]. Med Princ Pract, 2005,14(4): 230-234. 孕妇IgG 类红细胞血型不规则抗体对早期诊断 Non ABO HDN 的意义[J]. 中国生物制品学杂志Rh血型抗体的检测及结果分析（,-,）, 2007, 20(6): 406-408. . , 1997, 72(1): 45-51. [10] 溶血性输血反应与非ABO 新生儿溶血病不规则抗体的综合分析 临床检验杂志,2001, 19(6): 377-378.